鈣蛋白酶活性檢測測定試劑盒
產品名稱:鈣蛋白酶活性檢測測定試劑盒
英文名稱:Calpain Activity Assay Kit
貨號:K240-100
品牌:原裝進口
包裝:100次分析
保存建議: 請在接收到該鈣蛋白酶活性檢測測定試劑盒產品后,置于-20℃保存.
產品背景:
背景資料 鈣蛋白酶(Calpain)是細胞內依鈣中性半胱氨酸內肽酶.在體內,通過Ca2+激活及自溶而表現(xiàn)出蛋白水解酶的活性,并通過鈣蛋白酶抑制活化的鈣蛋白酶活性.鈣蛋白酶系統(tǒng)的主要作用對象是細胞骨架蛋白、蛋白激酶和磷酸酶以及激素受體.許多生理學和病理學的過程都依賴于鈣蛋白酶的活化(比如細胞凋亡).鈣蛋白酶的活化與質膜和鈣離子有關,被活化的鈣蛋白酶會釋放到細胞質中.但總的來說鈣蛋白酶系統(tǒng)的具體調控機理還不很清楚,還需要利用分子生物學等技術手段進行深入的研究.
產品描述: 鈣蛋白酶活性分析試劑盒提供了優(yōu)化的緩沖液和試劑以方便地測定鈣蛋白酶活性.提取緩沖液可以只提取細胞質蛋白,而不會影響細胞膜和溶酶體酶.提取緩沖液還能防止提取過程中的鈣蛋白酶的自活化.因此,該鈣蛋白酶活性試劑盒只檢測經(jīng)誘導物(比如化學試劑或者藥物)處理過的細胞的胞內活化鈣蛋白酶.利用熒光檢測的方法, 通過檢測鈣蛋白酶底物Ac-LLY-AFC的酶切降解而實現(xiàn).Ac-LLY-AFC能發(fā)射藍光(λmax = 400 nm),而被酶切后生成的自由AFC則釋放出黃綠光熒光(λmax = 505 nm),這種熒光可以用熒光計或者熒光分析儀讀取數(shù)據(jù).對比處理的樣品和正常對照組的樣品發(fā)射的熒光強度,就可以得出鈣活性的改變.
產品特點: 1、步驟簡單,只需要大約2小時即可完成檢測;2、操作快速并且方便;3、試劑盒內包含了陰性和陽性對照,我們也可以單獨提供活性的鈣蛋白酶、鈣蛋白酶抑制劑以及抗體
Activation of calpain is involved in many forms of physiological and pathological processes
(e.g., apoptosis). Calpain activation requires cell membrane and Ca2+, and activated calpain
is released into cytosol. The Calpain Activity Assay Kit provides optimized buffers and
reagents for a convenient measurement of calpain activity. The Extraction Buffer provided
with the kit specifically extracts cytosolic proteins without contaminations of cell membrane
and lysosome proteases. The Extraction Buffer also prevents auto-activation of calpain
during the extraction procedure. Thus, the kit detects only activated calpain in cytosol upon
treatment of cells with inducers (e.g., chemicals or drugs). The fluorometric assay is based
on the detection of cleavage of calpain substrate Ac-LLY-AFC. Ac-LLY-AFC emits blue light
(λmax = 400 nm); upon cleavage of the substrate by calpain, free AFC emits a yellow-green
fluorescence (λmax = 505 nm), which can be quantified using a fluorometer or a fluorecence
plate reader. Comparison of the fluorescence intensity from a treated sample with a normal
control allows determination of the changes in calpain activity. 如與英文說明書有異,以英文說明書為準。
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