羥自由基清除能力測(cè)定試劑盒說明書

For Research Use only

僅供研究用

貨號(hào)：QYS-23058

微量法  100管/96樣

注意：正式測(cè)定之前選擇 2-3 個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測(cè)定。

羥自由基清除能力測(cè)定意義：

羥自由基作用于體內(nèi)蛋白質(zhì)、核酸、脂類等生物分子，造成細(xì)胞結(jié)構(gòu)和功能受損，進(jìn)而導(dǎo)致體內(nèi)代謝紊亂引起疾病。羥自由基清除能力是

樣品抗氧化能力的重要指標(biāo)之一，在抗氧化類保健品和藥品研究中得到廣泛應(yīng)用。

羥自由基清除能力測(cè)定原理：

H₂O₂/ Fe²⁺ 通過 Fenton 反應(yīng)產(chǎn)生羥自由基，將鄰二氮菲- Fe2+水溶液中 Fe²⁺氧化為 Fe³⁺ ，導(dǎo)致 536nm 吸光度下降，樣品對(duì) 536nm

 吸光度下降速率的抑制程度，反映了樣品清除羥自由基的能力。

自備實(shí)驗(yàn)用品：

恒溫水浴鍋、可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96 孔板和蒸餾水。

羥自由基清除能力試劑組成和配制:

提取液：液體 100 mL×1 瓶，4℃保存。

試劑一：液體 5 mL×1 瓶，4℃避光保存。

試劑二：液體 15 mL×1 瓶，4℃保存。

試劑三：液體 3 mL×1 瓶，4℃保存。

試劑四：液體 3 mL×1 瓶，4℃保存。

樣品的制備：

1.組織：按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積(mL)為 1：5~10 的比例（建議稱取約 0.1g 組織，加入 1mL 提取液）進(jìn)行冰浴勻漿，然后

 10000g，4℃離心 10min，取上清，置冰上待測(cè)。

2.血清、果汁等液體樣品可直接測(cè)定。

3.提取物（或者藥物）可配制成一定濃度，如 5 mg/mL。

羥自由基清除能力試劑盒操作步驟：

1、 分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀預(yù)熱 30min，調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至 536nm，蒸餾水調(diào)零。

2、 操作表

空白管對(duì)照管測(cè)定管

試劑一（μL）303030

試劑二（μL）808080

試劑三（μL）202020

立即混勻，防止局部顏色過濃

樣品（μL）50

試劑四（μL）2020

H2O（μL）7050

混勻 37℃，20min，于微量石英比色皿/96 孔板中測(cè)定 536nm 處吸光值，空白管、對(duì)照管和測(cè)定管的吸光值分別記為 A 空、A 對(duì)和 A 測(cè)。

注意：空白管和標(biāo)準(zhǔn)管只需測(cè)定一次。

羥自由基清除能力試劑盒計(jì)算公式:

羥自由基清除率 D% =（A 測(cè)-A 對(duì)）÷（A 空-A 對(duì)）×100%

A 空、A 對(duì)、A 測(cè)：空白管、對(duì)照管和測(cè)定管的吸光值。

注意事項(xiàng):

為了比較不同樣品羥自由基清除能力，對(duì)于同一批樣品須加入等量的樣品，血清、組織勻

漿、果汁等液體樣品加入同樣體積，提取物（或者藥物）配制成同樣濃度。 

注：電子版說明書僅供參考、具體請(qǐng)參考試劑盒紙質(zhì)版說明書。

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