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技術(shù)服務(wù) Recruitment

植物類黃酮(Flavonoid)試劑盒說明書

For Research Use only

僅供研究用

貨號:QYS-23060

微量法  100管/96樣

注意:正式測定之前選擇 2-3 個預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測定。

植物類黃酮(Flavonoid)測定意義

類黃酮是一類多苯化合物,屬于植物次生代謝物,對人體具有消炎,抗菌,降血脂,清除體內(nèi)羥自由基,預(yù)防癌癥等作用。

植物類黃酮(Flavonoid)測定原理

在堿性亞硝酸鹽溶液中,類黃酮與鋁離子形成在 510nm 處有特征吸收峰的紅色絡(luò)合物,測定樣品提取液在 510nm 處的吸光值,即可計算

樣品類黃酮含量。

自備實驗用品及儀器

天平、烘箱、粉碎儀、篩子、超聲破碎儀、60%乙醇、離心機、可見分光光度計/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96 孔板、蒸餾水。

植物類黃酮(Flavonoid)含量試劑組成和配制

提取液:60%乙醇,自備。

試劑一:液體 1mL×1 管,4℃保存。

試劑二:液體 1mL×1 管,4℃保存。

試劑三:液體 10mL×1 瓶,4℃保存。

植物類黃酮(Flavonoid)提取

將樣本烘干至恒重,粉碎,過 40 目篩之后,稱取約 0.02g,加入 2mL 提取液,60℃振蕩提取 2h,10000g,25℃,離心 10min,取上清

待測。

試劑盒測定操作表

1、 分光光度計/酶標(biāo)儀預(yù)熱 30min,調(diào)節(jié)波長至 510nm,蒸餾水調(diào)零。

2、 操作表

空白管測定管

樣本待測液(μL)108

蒸餾水(μL)108

試劑一(μL)66

混勻,25℃靜置 6min

試劑二(μL)66

混勻,25℃靜置 6min

試劑三(μL)8080

混勻,25℃靜置 15 min,測定 510nm 處吸光值。ΔA=A 測定-A 空白,空白管只要做一管。

植物類黃酮(Flavonoid)含量計算公式

a.用微量石英比色皿測定的計算公式如下

標(biāo)準(zhǔn)曲線:y = 5.02x+0.0007,R2 = 0.9996

類黃酮含量(mg/g 干重)=(ΔA -0.0007)÷5.02×V 樣÷(V 樣÷V 樣總×W)= 0.398×(ΔA -0.0007)÷W

V 樣總:加入提取液體積,2.5mL; V 樣:反應(yīng)中樣品體積,0.108mL; W:樣品質(zhì)量,g

b.用 96 孔板測定的計算公式如下

標(biāo)準(zhǔn)曲線:y = 2.51x+0.0007,R2 = 0.9996

類黃酮含量(mg/g 干重)=(ΔA -0.0007)÷2.51×V 樣÷(V 樣÷V 樣總×W)= 0.797×(ΔA -0.0007)÷W

V 樣總:加入提取液體積,2mL;V 樣:反應(yīng)中樣品體積,0.108mL;W:樣品質(zhì)量,g

注:電子版說明書僅供參考、具體請參考試劑盒紙質(zhì)版說書。

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