白細(xì)胞裂解液

White Blood Cell Lysis Buffer

For Research Use only

僅供研究用

貨號(hào)：QYS-SH0642

10ml

白細(xì)胞裂解液產(chǎn)品簡介：

可以用于全血中祛除紅細(xì)胞后，白細(xì)胞中的核酸與蛋白的的進(jìn)一步分離和提取等，所得到的白細(xì)胞基因組可以用于細(xì)胞分子生物學(xué)的

各種實(shí)驗(yàn)。所得到的蛋白質(zhì)可以用于白細(xì)胞中蛋白質(zhì)分離純化和蛋白質(zhì)電泳。

試劑的組成和配置：

白細(xì)胞裂解液：液體10 mLL×1 瓶，常溫下運(yùn)輸，收到后，將白細(xì)胞裂解液在4℃的冰箱冷藏室中保存，保質(zhì)期兩年。

白細(xì)胞裂解液操作步驟：

1. 采集新鮮血液，用EDTA、肝素或檸檬酸抗凝，取0.5 mL抗凝全血，加入紅細(xì)胞裂解液，充分震蕩混勻，在室溫下放置5 min，再10000 

rpm（10000 g）離心2 min，棄上清。

2. DNA提?。簩⒊恋碛秒p蒸水洗滌兩次，10000 rpm 離心10 min，搜集灰白色的白細(xì)胞沉淀，加入溶液A 400 μL和0.4 mg蛋白酶K于沉淀

中，55°C水浴2 h。再加入100 μL 7.5 mol/L 乙酸銨，10000 rpm，離心l0 min。取上清，加人2 倍體積無水乙醇，上下振搖，至DNA 

沉淀出，10 000 rpm 離心10 min回收沉淀。用1 mL 70％乙醇洗滌沉淀物1 次，離心，干燥沉淀，溶于 30 μL TE 中。

3. 蛋白提?。簩⒊恋碛秒p蒸水洗滌兩次，10000 rpm 離心10 min，搜集灰白色的白細(xì)胞沉淀，加入溶液A 400 μL，震蕩并4℃放置10

 min后，10000 rpm離心l0 min，上清可以用于SDS-PAGE 電泳。

白細(xì)胞裂解液注意事項(xiàng)：

1. 加乙酸氨，離心10 min后，蛋白質(zhì)沉到管的底部形成緊密地深棕色斑塊。

2. 如果溶液A在低溫下產(chǎn)生沉淀，請(qǐng)30°C溫浴10 min，以促進(jìn)溶解。

3. 使用后，請(qǐng)旋緊瓶蓋，防止溶液揮發(fā)和與空氣的物質(zhì)發(fā)生化學(xué)反應(yīng)。

4. 本試劑只能夠用于體外實(shí)驗(yàn)，不能夠用于臨床、治療和動(dòng)物體內(nèi)實(shí)驗(yàn)等，由此產(chǎn)生的后果概不承擔(dān)責(zé)任。

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