細(xì)胞凍存是細(xì)胞培養(yǎng)中的重要環(huán)節(jié)。大家都知道，凍存技術(shù)要點(diǎn)是慢凍，標(biāo)準(zhǔn)的凍存程序?yàn)榻禍厮俾?1～-2oC/ min；當(dāng)溫度達(dá)-25℃以下時(shí)，可增至-5 oC～-10 oC /min。之前，常用的傳統(tǒng)方法是將凍存管置于4 oC 30分鐘--->-20 oC 60分鐘--->-80 oC過(guò)夜--->液氮罐。不過(guò)，由于步驟較多，間隔時(shí)間又長(zhǎng)，很容易遺忘。 

之后，人們也開始使用程序降溫盒。將凍存管放入程序降溫盒中，再將程序降溫盒放入-80oC冰箱。由于程序降溫盒中填充了異丙醇，所以能以1oC/min的速度進(jìn)行降溫。然而，異丙醇屬于有毒溶劑，又容易揮發(fā)，長(zhǎng)期使用不但會(huì)對(duì)環(huán)境造成污染，也對(duì)實(shí)驗(yàn)人員的安全有不利影響。

邁阿密大學(xué)生物系的Kai Y為我們介紹了一種新的細(xì)胞程序降溫盒。這種名為CoolCell的降溫盒由美國(guó)Biocision公司生產(chǎn)，不需要使用酒精，就能以1oC/min的速度對(duì)細(xì)胞降溫。他表示，這種容器很容易放凍存管，在冷凍之后也很容易打開，使用很方便。

基于熱傳導(dǎo)原理和精密工程而開發(fā)，CoolCell可精確控制降溫速度，適用于原代細(xì)胞、細(xì)胞系、干細(xì)胞、酵母及其他細(xì)胞類型。同時(shí)，由于不使用異丙醇，也更加環(huán)保。

據(jù)介紹，目前CoolCell已經(jīng)被包括ATCC等眾多機(jī)構(gòu)以及科研單位所采用，代替他們之前使用的基于異丙醇的細(xì)胞程序降溫盒。從客戶的反饋來(lái)看，CoolCell與之前的產(chǎn)品在凍存細(xì)胞效果上一樣好，尤其是在原代細(xì)胞的凍存上，CoolCell的結(jié)果更加穩(wěn)定。

之前，研究人員利用CoolCell及其他常用的方法對(duì)兩種胚胎干細(xì)胞系（RC-7和RC-10）進(jìn)行凍存，并比較解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇率。他們發(fā)現(xiàn)，使用CoolCell，活細(xì)胞數(shù)提高33%，而附著在組織培養(yǎng)板上的干細(xì)胞數(shù)量增加。此外，不使用異丙醇，每年可節(jié)省相關(guān)的處理費(fèi)用340美元。

如今，CoolCell這種細(xì)胞凍存方案已經(jīng)被收入《Current Protocols in Immunology》的Cryopreservation and Thawing of Cells中，作為細(xì)胞凍存的標(biāo)準(zhǔn)protocol進(jìn)行推廣。這種降溫盒也有多種規(guī)格，適合不同大小的凍存管，在選購(gòu)時(shí)需要注意。